ఎంజైమ్ ఇంజనీరింగ్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

పెప్టైడ్‌ల యొక్క సైటోటాక్సిక్ చర్య పారాస్పోరిన్ 2Aa1 నుండి తీసుకోబడింది మరియు పెద్దప్రేగు క్యాన్సర్ SW480 కణాలకు వ్యతిరేకంగా దాని అనలాగ్‌లు

జెన్నిఫర్ క్రజ్

పారాస్పోరిన్-2 (PS2Aa1) అనేది బాసిల్లస్ తురింజియెన్సిస్ ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన ఒక టాక్సిన్ మరియు ఇది క్యాన్సర్ కణ తంతువులకు వ్యతిరేకంగా అధిక సైటోటాక్సిసిటీని చూపింది: MOLT-4, జుర్కాట్, సవానో మరియు హెప్జి2. దీని ప్రకారం, దాని సైటోటాక్సిక్ ప్రభావాన్ని వివరించడానికి, బహుళ-దశల మెకానిజం మోడల్ ప్రతిపాదించబడింది: మొదట, PS2Aa1 GPI-యాంకర్డ్ గ్రాహకాలు లేదా పొరలోని ఇతర ప్రోటీన్‌లకు కట్టుబడి ఉంటుంది; అప్పుడు, సాంద్రీకృత టాక్సిన్స్ ఒలిగోమెరైజ్ చేయబడతాయి, ఆ తరువాత, ట్రాన్స్మెంబ్రేన్ రంధ్రాలు ఏర్పడతాయి, పొర పారగమ్యత (1) లోకి నష్టాన్ని సృష్టిస్తుంది. అయినప్పటికీ, దాని చర్య యొక్క యంత్రాంగం పూర్తిగా వివరించబడలేదు. అందువల్ల, ఈ పరిశోధన పనిలో మేము Fmoc వ్యూహం ద్వారా PS2Aa1 యొక్క ఫ్రాగ్మెంటేషన్, పెప్టైడ్‌లను సంశ్లేషణ చేసాము. మేము PS2Aa1 యొక్క విభిన్న డొమైన్‌ల నుండి తీసుకోబడిన 3 పెప్టైడ్‌లను పొందాము: P264-G274, Loop1-PS2Aa మరియు Loop2-PS2Aa. అదనంగా, P264-G274 (P264-V268K, P264-V268W, మరియు P264-V268H) యొక్క 3 ఉత్పన్నాలు, Loop1-PS2Aa (Loop1-Y5K) యొక్క 1 ఉత్పన్నం మరియు Loop2-PS2Aa యొక్క 1 ఉత్పన్నం (Loop2-Noop4) పొందబడ్డాయి. సమ్మేళనాల ఛార్జ్ మరియు హైడ్రోఫోబిసిటీ పెరుగుదల ద్వారా ప్రతి అవశేషాలలో మార్పులు మద్దతు ఇవ్వబడ్డాయి. పెప్టైడ్స్ యొక్క ద్వితీయ నిర్మాణాలు వృత్తాకార డైక్రోయిజం (DC) స్పెక్ట్రా ద్వారా నిర్ధారించబడ్డాయి. PS2Aa1 యొక్క అన్ని పెప్టైడ్‌లు 190 nm వద్ద గరిష్ట శోషణ బ్యాండ్ మరియు 205-220 nm మధ్య రెండు కనిష్ట శోషణ బ్యాండ్‌లతో α- హెలిక్స్ యొక్క ద్వితీయ నిర్మాణాన్ని ప్రదర్శించాయి. అదనంగా, అన్ని పెప్టైడ్‌లు 100 µM కంటే తక్కువ HC _50ని కలిగి ఉన్నాయని చూపిస్తూ , సానుకూల నియంత్రణ (TX-100 0.1 %)తో పోలిస్తే 24% కంటే తక్కువ హిమోలిసిస్‌తో మానవ ఎరిథ్రోసైట్‌ల హెమోలిసిస్ డిగ్రీ నిర్ణయించబడింది. చివరగా, మొత్తం పెప్టైడ్‌లు SW480కి వ్యతిరేకంగా కార్యాచరణను ప్రదర్శించాయి ; 5.716 μM యొక్క IC _{50 తో P264-V268K అత్యంత సక్రియంగా ఉందని} హైలైట్ చేస్తుంది . 5-ఫ్లోరోరాసిల్, కెమోథెరపీ ఔషధం, సానుకూల నియంత్రణగా తీసుకోబడింది . ఈ ఫలితాలు P264-V268K SW480 పెద్దప్రేగు కాన్సర్ కణాల చికిత్సలో సురక్షితమైన, ఎంపిక చేసిన మరియు బహుశా కొత్త చర్యతో గొప్ప సామర్థ్యాన్ని కలిగి ఉన్నాయని స్పష్టంగా చూపిస్తున్నాయి.