జర్నల్ ఆఫ్ క్లినికల్ అండ్ ఎక్స్పెరిమెంటల్ ఆప్తాల్మాలజీ
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

టూ-డైమెన్షనల్ డిఫరెన్షియల్ ఇన్-జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (2D-DIGE) మానవ ట్రాబెక్యులర్ మెష్‌వర్క్ కణాలలో క్రాస్-లింక్డ్ ఆక్టిన్ నెట్‌వర్క్‌లతో అనుబంధించబడిన ప్రోటీన్‌లను వెల్లడిస్తుంది

జాక్లిన్ వై బెర్ముడెజ్, హన్నా సి వెబ్బర్, గౌరంగ్ సి పటేల్, లియాంగ్-జున్ యాన్, అబాట్ ఎఫ్ క్లార్క్ మరియు వీమింగ్ మావో

నేపథ్యం: ప్రైమరీ-ఓపెన్ యాంగిల్ గ్లాకోమా (POAG)కి ప్రాథమిక ప్రమాద కారకం ఇంట్రాకోక్యులర్ ప్రెజర్ (IOP) పెరిగింది. POAG రోగులలో, ట్రాబెక్యులర్ మెష్‌వర్క్ (TM) ద్వారా బయటికి వచ్చే ప్రతిఘటన అసాధారణంగా పెరుగుతుంది. TMలో ముఖ్యమైన గ్లాకోమా -సంబంధిత రోగలక్షణ మార్పులలో ఒకటి అధిక క్రాస్-లింక్డ్ ఆక్టిన్ నెట్‌వర్క్‌లు (CLANలు) ఏర్పడటం. CLANలు సంగమ గ్లాకోమా TM కణాలు మరియు కణజాలాలలో కనిపించే వెబ్ లాంటి బహుభుజి నిర్మాణాలు. గ్లాకోమా-సంబంధిత కారకాలు గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ బీటా 2 (TGFβ2) రూపాంతరం చెందుతాయి మరియు గ్లూకోకార్టికాయిడ్లు నాన్-గ్లాకోమా TM కణాలలో (NTM) CLAN ఏర్పడటానికి ప్రేరేపిస్తాయి. CLAN లు కణ దృఢత్వాన్ని పెంచుతాయి మరియు హోమియోస్టాసిస్‌ను మార్చవచ్చు మరియు తద్వారా ఎలివేటెడ్ IOPకి దోహదం చేస్తాయి.

పద్ధతులు: మేము CLAN-అనుబంధ ప్రోటీన్‌లను గుర్తించడానికి ప్రోటీమిక్ విధానాన్ని ఉపయోగించాము. CLANలను ప్రేరేపించడానికి మేము 0.1% ఇథనాల్ (EtOH; వాహనం), 100 nM డెక్సామెథాసోన్ (DEX), లేదా 5 ng/ml TGFβ2 ప్లస్ 0.1% EtOHతో సంగమించే ప్రాథమిక NTM కణాలకు చికిత్స చేసాము. సైటోస్కెలిటన్‌ను కలిగి ఉన్న ట్రిటాన్ కరగని భిన్నం టూ-డైమెన్షనల్ డిఫరెన్షియల్ ఇన్-జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (2D-DIGE) కోసం సంగ్రహించబడింది. 2D-జెల్స్‌లోని అవకలన వ్యక్తీకరించబడిన ప్రోటీన్‌లను గుర్తించడానికి మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (MS) ఉపయోగించబడింది . CLANలతో గుర్తించబడిన ప్రోటీన్ల సహ-స్థానికీకరణ ఇమ్యునోసైటోఫ్లోరోసెన్స్ (ICF) మైక్రోస్కోపీని ఉపయోగించి నిర్ధారించబడింది.

ఫలితాలు: 2D-DIGE రెండు చికిత్స సమూహాలలో 103 విభిన్నంగా వ్యక్తీకరించబడిన ప్రోటీన్‌లను వెల్లడించింది. అత్యంత సుసంపన్నమైన 23 ప్రొటీన్‌లను గుర్తించింది. కాల్డెస్మోన్, కాల్పోనిన్, మైయోసిన్ లైట్ చైన్ మరియు ట్రోపోమియోసిన్ CLANలతో కలిసిపోయాయని ICF చూపించింది.

తీర్మానాలు: DEX లేదా TGFβ2- ప్రేరిత CLAN నిర్మాణంతో NTM కణాలలో విభిన్నంగా వ్యక్తీకరించబడిన ప్రోటీన్‌ల ఉపసమితిని మేము గుర్తించాము. CLAN నిర్మాణం మరియు/లేదా నిర్వహణలో ఈ ప్రోటీన్‌ల సంభావ్య ప్రమేయానికి తదుపరి పరిశోధన అవసరం. ఈ ప్రొటీన్‌లు గ్లాకోమా వ్యాధికారకత గురించి కొత్త అంతర్దృష్టులను అందించవచ్చు.