ఆండ్రాలజీ-ఓపెన్ యాక్సెస్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

స్పెర్మ్ క్రోమాటిన్ సంగ్రహణ స్థాయి: ఫిక్సేటివ్‌లపై ఆధారపడి ఉంటుంది

తులే ఐరెజ్, తుగ్సే డర్మస్

స్పెర్మాటోజెనిసిస్ సమయంలో స్పెర్మ్ క్రోమాటిన్ నిర్మాణాత్మక మార్పులకు లోనవుతుంది, ఇది అధిక సంక్షేపణకు కారణమవుతుంది. ఈ న్యూక్లియర్ ఎక్స్ఛేంజ్ స్పెర్మ్-ఫలదీకరణ సామర్థ్యం మరియు గర్భధారణ ఫలితాల అంచనాగా పరిగణించబడుతుంది. వివిధ అధ్యయనాలు మగ వంధ్యత్వం మరియు స్పెర్మ్ ప్రోటామైన్ లోపం మధ్య సంబంధాన్ని చూపించాయి మరియు ఇది స్పెర్మ్ DNA సమగ్రతకు ముఖ్యమైన నిర్ణయాధికారి కావచ్చునని సూచించబడింది. యాసిడ్ అనిలిన్ బ్లూ స్టెయినింగ్ తరచుగా గ్లూటరాల్డిహైడ్ స్థిరీకరణతో ఉపయోగించబడుతుంది మరియు స్పెర్మ్ న్యూక్లియస్‌లోని లైసిన్ కారణంగా హిస్టోన్‌లను మరక చేస్తుంది. స్పెర్మ్ న్యూక్లియైలోని హిస్టోన్‌ల స్థాయి DNA దెబ్బతినడం మరియు వంధ్యత్వానికి దగ్గరి సంబంధం కలిగి ఉందని పరిశోధనలో తేలింది. స్పెర్మ్ క్రోమాటిన్ సంక్షేపణం స్పెర్మ్ న్యూక్లియస్‌లో ప్రోటామైన్ ఉనికి ద్వారా వ్యక్తీకరించబడుతుంది, అంటే హిస్టోన్ లేకపోవడం. ఈ అధ్యయనంలో, వివిధ స్థిరీకరణ పద్ధతులు వర్తించినప్పుడు అనిలిన్ బ్లూ స్టెయినింగ్ పద్ధతి స్పెర్మ్ క్రోమాటిన్ సంగ్రహణను ఎలా సరిగ్గా నిర్ణయించగలదో మేము పరిశోధించాము. ఈ అధ్యయనంలో నాలుగు వేర్వేరు ఫిక్సేటివ్‌లు ఉపయోగించబడ్డాయి. ఫిక్సేటివ్‌లు గ్లూటరాల్డిహైడ్ (2.5%), మిథనాల్/ఎసిటిక్ యాసిడ్ కార్నీస్, (3/1), ఇథైల్ ఆల్కహాల్ (98%), మరియు ఫార్మాల్డిహైడ్ (10%) అనిలిన్ బ్లూ డైతో సైటోలాజికల్ సన్నాహాలలో సాంప్రదాయిక సాంద్రతలలో వర్తించబడతాయి. ఈ ఫిక్సేటివ్‌లలో, స్పెర్మ్ హిస్టోన్‌లను ప్రదర్శించడానికి గ్లూటరాల్డిహైడ్ విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతుంది. వివిధ ఫిక్సేటివ్‌లలో క్రోమాటిన్ కండెన్సేషన్ (అనిలిన్ బ్లూ నెగటివ్) రేట్లలో తేడాలను లెక్కించడానికి విద్యార్థులు -T-పరీక్ష మరియు వైవిధ్యం యొక్క పునరావృత కొలతల విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది. గ్లుటరాల్డిహైడ్ ఫిక్సేషన్‌తో పొందిన క్రోమాటిన్ కండెన్సేషన్ విలువలను మిథనాల్ మరియు ఆల్కహాల్ ఫిక్సేషన్‌తో పొందిన వాటితో పోల్చినప్పుడు, గణాంకపరంగా ముఖ్యమైన తేడాలు (p=0.014,p=0.0001) గమనించబడ్డాయి. గ్లూటరాల్డిహైడ్ మరియు ఫార్మాల్డిహైడ్ (p=0.51) మధ్య సానుకూల సహసంబంధం, మరియు గ్లూటరాల్డిహైడ్ మరియు ఫార్మాల్డిహైడ్, మిథనాల్/ఎసిటిక్ యాసిడ్ మరియు ఆల్కహాల్ స్థిరీకరణ (p=0.005,p=0.0005 Ve p=0.0005,p=0.007) మధ్య ప్రతికూల సహసంబంధం గమనించబడ్డాయి. స్పెర్మ్ ఏకాగ్రత మరియు చలనశీలతతో క్రోమాటిన్ సంగ్రహణ యొక్క సానుకూల సహసంబంధం నిర్ణయించబడింది (p=0.012,p <0,001). ఈ అధ్యయనంలో పొందిన ఫలితాల ప్రకారం, 2.5% గ్లూటరాల్డిహైడ్ మరియు 10% ఫార్మాల్డిహైడ్ స్థిరీకరణలు అనిలిన్ బ్లూతో క్రోమాటిన్ సంగ్రహణను నిర్ణయించడానికి తగినవి, అయితే ఈ ప్రయోజనం కోసం మిథనాల్/ఎసిటిక్ యాసిడ్ మరియు ఇథైల్ ఆల్కహాల్ తగినవి కావు. మా అధ్యయనంలో మేము పరీక్షించిన ఆల్కహాల్-ఆధారిత ఫిక్సేటివ్‌లు స్పెర్మ్ లైసిన్‌ను ప్రత్యేకంగా చూపించలేదని మరియు మొత్తం కేంద్రకం అనిలిన్ బ్లూతో తడిసినట్లు గమనించబడింది.