బయాలజీ & మెడిసిన్లో అధునాతన సాంకేతికతలు
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్ మెల్ట్-కర్వ్ విశ్లేషణ ద్వారా ఉత్పరివర్తనలు/SNPల స్క్రీనింగ్: నాన్-ఎలెక్ట్రోఫోరేటిక్ మరియు నో-డై మెథడ్ ఆఫ్ మ్యుటేషన్ డిటెక్షన్‌పై ప్రాథమిక అధ్యయనం

ఆరిఫ్ అహ్మద్*, మహ్మద్ షాహిద్, మహ్మద్ రైష్ మరియు సయ్యద్ అక్తర్ హుస్సేన్

మ్యుటేషన్ యొక్క స్క్రీనింగ్ కోసం ప్రస్తుతం అందుబాటులో ఉన్న పద్ధతులకు ఫ్లోరోసెంట్ లేబుల్ ప్రోబ్/డై లేదా ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ లేదా రెండూ ఈ పద్ధతులను దుర్భరమైనవి, ఖరీదైనవి మరియు ఎక్కువ సమయం తీసుకుంటాయి. ప్రోబ్/డై మరియు ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ అవసరం లేకుండా మ్యుటేషన్/SNP యొక్క స్క్రీనింగ్ పద్ధతిని మేము ఇక్కడ వివరించాము. సాంకేతికతకు PCR ఉత్పత్తి మరియు పెల్టియర్‌తో కూడిన స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్ మాత్రమే అవసరం. మేము డ్యూప్లెక్స్ కరిగించడం ద్వారా UV యొక్క శోషణను రికార్డ్ చేయడం ద్వారా DNA మెల్టింగ్ ప్రొఫైల్ మరియు హోమోడుప్లెక్స్ మరియు హెటెరోడుప్లెక్స్ యొక్క పరివర్తన ఉష్ణోగ్రతను పర్యవేక్షించడం ద్వారా మ్యుటేషన్‌ని పరీక్షించాము. ప్రతి డ్యూప్లెక్స్ కోసం శోషణం 260 nm వద్ద 60 ° C నుండి 85 ° C వరకు 1 ° C ఉష్ణోగ్రత పెరుగుదల వద్ద స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్ 1 ° C / min తాపన రేటుతో పెల్టియర్‌ని ఉపయోగించి కొలుస్తారు. హెటెరోడుప్లెక్స్ నమూనాలలో 70 ° C పరివర్తన ఉష్ణోగ్రతల వద్ద UV యొక్క శోషణ వేగంగా పెరుగుతుంది. homoduplex నమూనాలో ఉన్నప్పుడు అది 75°C తర్వాత చేరుకుంటుంది. హోమోడుప్లెక్స్‌తో పోలిస్తే హెటెరోడుప్లెక్స్ నమూనాల పరివర్తన ఉష్ణోగ్రత తగ్గడాన్ని గమనించడం ద్వారా నమూనాలోని మ్యుటేషన్ కనుగొనబడింది.