మెడికల్ డయాగ్నస్టిక్ మెథడ్స్ జర్నల్
అందరికి ప్రవేశం
ISSN: 2168-9784
ISSN: 2168-9784
సతోరు కనేకో*, కియోషి తకమత్సు
లక్ష్యాలు: స్పెర్మ్ క్రోమాటిన్ డిస్పర్షన్ టెస్ట్ (SCD) మరియు కామెట్ అస్సే (CA) సూత్రాలు మరియు పరిమాణాత్మక పనితీరును పునఃపరిశీలించడానికి ఇంటర్‌కంపారిటివ్ అధ్యయనాలు చేయడం.
పద్ధతులు: చివరి దశ ఫ్రాగ్మెంటేషన్‌లో గ్రాన్యులర్ శకలాలు లేకుండా మరియు లేకుండా మానవ స్పెర్మ్ నార్మోజోస్పెర్మిక్ వీర్యం నుండి శుద్ధి చేయబడింది మరియు సహజంగా సంభవించే ప్రతికూల మరియు సానుకూల నియంత్రణలుగా (వరుసగా NC మరియు PC) ఉపయోగించబడింది. SCD మరియు CA రెండూ 2.0 mol/L NaCl, 1.0 mmol/L DTTతో న్యూక్లియోప్రొటీన్‌లను సంగ్రహించాయి. SCD DNA నష్టం వైలెట్ హాలో ప్రాంతానికి విలోమానుపాతంలో ఉందని నిర్ధారించింది. CA కణిక శకలాల సంఖ్య నుండి ఎలెక్ట్రోఫోరేటికల్‌గా DNA నష్టం స్థాయిని అంచనా వేసింది; కామెట్ టెయిల్ అని పిలవబడే వాటి ఎలెక్ట్రోఫోరేటిక్ లక్షణాలు సింగిల్-సెల్ పల్సెడ్-ఫీల్డ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (SCPFGE)తో పోల్చబడ్డాయి.
ఫలితాలు: SCDలోని వైలెట్ హాలో క్రిస్టల్ వైలెట్ (CV)-స్టెయిన్‌బుల్ న్యూక్లియోప్రొటీన్‌లను కలిగి ఉన్నట్లు నిర్ణయించబడింది, ఇవి రేడియేటెడ్ DNA ఫైబర్‌లకు కట్టుబడి ఉంటాయి. SCD NC మరియు PC మధ్య తేడాను గుర్తించలేకపోయింది. అవశేష న్యూక్లియోప్రొటీన్లు సహజ CAలో DNA యొక్క వలసలను నిరోధించాయి; దీనికి విరుద్ధంగా, ఇన్-జెల్ ట్రిప్టిక్ డైజెషన్‌తో SCPFGE పొడుగుచేసిన DNA ఫైబర్‌లను దాటి ఫైబరస్ మరియు గ్రాన్యులర్ శకలాలను విడుదల చేసింది. ఆల్కలీన్ CA DNA 0.3 mol/L NaOHలో అమలు చేయబడింది. DNA కణిక శకలాలుగా విభజించబడినప్పటికీ, అవశేష న్యూక్లియోప్రొటీన్లు DNAకి తమ బంధన సామర్థ్యాన్ని నిలుపుకున్నాయి మరియు ఇప్పటికీ కొత్తగా ఉత్పత్తి చేయబడిన శకలాలు పరిష్కరించబడ్డాయి.
ముగింపు: DNA ఫ్రాగ్మెంటేషన్ విశ్లేషణలకు వేరు చేయబడిన మోటైల్ స్పెర్మ్‌లో ఫ్రాగ్మెంటేషన్ యొక్క ప్రారంభ దశను కొలవడం అవసరం, ప్రోటీయోలిసిస్ లేకపోవడం తటస్థ మరియు ఆల్కలీన్ CA యొక్క పరిమాణాత్మక పనితీరును తగ్గిస్తుంది. మొత్తంమీద, క్లినికల్ స్టాటిస్టిక్స్ కోసం డేటాను సేకరించే సాధనాలుగా SCD మరియు CA తగినంతగా సున్నితంగా లేవని ఫలితాలు సూచించాయి.