మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ & ప్యూరిఫికేషన్ టెక్నిక్స్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

రోహితుకిన్ అంచనా మరియు ADME/ప్రీ-క్లినికల్ ఫార్మాకోకైనటిక్స్‌లో దాని అప్లికేషన్ కోసం న్యూ డెవలప్ హైలీ సెన్సిటివ్, సింపుల్ LCMS/MS పద్ధతిని తిరిగి ధృవీకరించడం

అమరీందర్ సింగ్, ప్రియా వజీర్, పంకజ్ చిబ్బర్, నితికా కపూర్, అమిత్ కుమార్, ఉత్పల్ నంది, సుమిత్ జి గాంధీ, సుర్జీత్ సింగ్, మనోజ్ కుమార్ టికూ, రామ్ విశ్వకర్మ మరియు గురుదర్శన్ సింగ్

ప్లాస్మాలోని క్రోమోన్ ఆల్కలాయిడ్ రోహితుకిన్‌ని నిర్ణయించడానికి సులభమైన, వేగవంతమైన, ఖచ్చితమైన, పునరుత్పత్తి చేయగల మరియు సున్నితమైన లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ-టాండమ్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (LC-MS/MS) పద్ధతిని అభివృద్ధి చేయడం పరిశోధన యొక్క ఉద్దేశ్యం. 0.1% (v/v) ఫార్మిక్ యాసిడ్ (80:20, %v/v)తో సేంద్రీయ ద్రావకం అసిటోనిట్రైల్ యొక్క ఐసోక్రటిక్ కూర్పును ఉపయోగించి అధిక రిజల్యూషన్ RP18e క్రోమోలిత్ కాలమ్ (100 × 4.6 మిమీ, 2 μm)తో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన సాధించబడింది. ప్రవాహం రేటు 0.5 mL/min. 306.05>245.10 మరియు రోహితుకిన్ కోసం 306.05>231.05 మరియు 330.30>IS.05 వంటి MS/MS అయాన్ పరివర్తనలను అంచనా వేయడానికి బహుళ రియాక్షన్ మానిటరింగ్‌లో పనిచేసే సానుకూల ఎలక్ట్రోస్ప్రే అయనీకరణ (ESI) సాంకేతికతతో కూడిన ట్రిపుల్ క్వాడ్రూపోల్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ. నమూనా తయారీకి సాధారణ సింగిల్ స్టెప్ ప్రోటీన్ అవక్షేప పద్ధతి ఉపయోగించబడింది. FDA మార్గదర్శకాల ప్రకారం నిర్దిష్టత, సరళత, ఖచ్చితత్వం, ఖచ్చితత్వం, పునరుద్ధరణ, మాతృక ప్రభావం మరియు స్థిరత్వం కోసం ఈ పద్ధతి ధృవీకరించబడింది. ఎలుకల ప్లాస్మాలో 0.1 ng/mL నుండి 1000 ng/mL వరకు ఏకాగ్రత పరిధి అంతటా విశ్లేషణ యొక్క సరళత పొందబడింది. నోటి ద్వారా (20 mg/kg) మరియు ఇంట్రావీనస్ (2 mg/kg) మార్గం ద్వారా ఆడ BALB/c ఎలుకలపై ఫార్మాకోకైనటిక్ అధ్యయనం నిర్వహించబడింది, ఇక్కడ రోహితుకిన్ యొక్క నోటి జీవ లభ్యత 84% పొందింది. మౌస్, ఎలుక మరియు మానవ కాలేయ మైక్రోసోమ్‌లలో ప్లాస్మా ప్రోటీన్ బైండింగ్ అధ్యయనం, పారగమ్యత మరియు మైక్రోసోమల్ స్థిరత్వాన్ని నిర్ణయించడానికి బయోఅనలిటికల్ పద్ధతి విజయవంతంగా ఉపయోగించబడింది.