బయాలజీ & మెడిసిన్లో అధునాతన సాంకేతికతలు
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

చైనీస్ చిట్టెలుక ఊపిరితిత్తుల కణ ఉత్పరివర్తనలో క్లోన్డ్ హ్యూమన్ జీన్ ఉపయోగించి మైటోకాన్డ్రియల్ జీన్ ఎక్స్‌ప్రెషన్ పునరుద్ధరణ

జాకీ ఎ షెరీఫ్ మరియు కరోలిన్ W బ్రూమ్

నేపథ్యం: Gal-32 అనేది చైనీస్ చిట్టెలుక ఊపిరితిత్తుల కణం న్యూక్లియర్ మ్యూటాంట్, ఇది మైటోకాన్డ్రియల్ ప్రోటీన్ సంశ్లేషణలో లోపం కారణంగా గెలాక్టోస్‌లో పెరగదు. Gal-32 జన్యువు యొక్క ఉత్పత్తి తెలియదు కాబట్టి, Gal-32 మ్యుటేషన్‌ను సరిదిద్దే మానవ జన్యువును క్లోన్ చేయడానికి ఫినోటైపిక్ పూరకాన్ని ఉపయోగించడం అత్యవసరం.

ఫలితాలు: రిసెసివ్ గాల్-32 కణాలు pSV2-నియో ప్లాస్మిడ్ DNAతో కలిసి రూపాంతరం చెందాయి మరియు మానవ జన్యుసంబంధమైన లైబ్రరీ నుండి మానవ జన్యుసంబంధమైన లైబ్రరీ నుండి మరియు pSV13 వెక్టర్‌లో ఉన్న క్లోరాంఫెనికాల్-రెసిస్టెన్స్ (క్యామర్) జన్యువును కలిగి ఉంటాయి. గెలాక్టోస్ మరియు నియోమైసిన్ అనలాగ్ G418 పెరుగుదల ద్వారా ప్రాథమిక పరివర్తనాలు ఎంపిక చేయబడ్డాయి. మానవ Gal+ జన్యువును రక్షించడానికి, ప్రాథమిక పరివర్తన DNA మరియు pCV108 కాస్మిడ్ వెక్టర్‌తో ఒక జన్యు గ్రంథాలయం నిర్మించబడింది. సమీపంలోని మానవ శ్రేణులతో క్లోన్‌లను గుర్తించడానికి కెమెరా జన్యువు ఉపయోగించబడింది. రెండు camr, Alu-హైబ్రిడైజింగ్ క్లోన్‌ల నుండి DNA తిరోగమన Gal-32 కణాలను Gal+ ఫినోటైప్‌గా మార్చగలిగింది మరియు మైటోకాన్డ్రియల్ ప్రోటీన్ సంశ్లేషణను పునరుద్ధరించింది.

ముగింపు: ఈ డేటా చైనీస్ చిట్టెలుక Gal-32 మ్యుటేషన్‌ను పూర్తి చేసే మరియు గెలాక్టోస్ జీవక్రియను పునరుద్ధరించే మానవ జన్యువును కలిగి ఉన్న రెండు pCV108-ట్రాన్స్‌ఫార్మెంట్ రీకాంబినెంట్ క్లోన్‌ల ఐసోలేషన్‌ను ప్రదర్శిస్తుంది.