మెడికల్ డయాగ్నస్టిక్ మెథడ్స్ జర్నల్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

రియాక్టివ్ బ్లూ డై: హ్యూమన్ స్పెర్మ్‌లోని వాక్యూల్స్ యొక్క ముఖ్యాంశాలు

సతోరు కనెకో*, యుకీ ఒకాడా, సతోషి యోకోటా, కియోషి తకమాట్సు

లక్ష్యాలు: ఆండ్రాలజీకి సంబంధించిన WHO రిఫరెన్స్ మాన్యువల్ పురుషుల వంధ్యత్వాన్ని అంచనా వేయడానికి స్పెర్మ్ హెడ్ యొక్క రూపురేఖలను కీలక పారామీటర్‌గా పరిగణిస్తుంది మరియు అంతర్గత వాక్యూల్స్‌ను తల లోపాలుగా వర్గీకరిస్తుంది. వాక్యూల్స్ యొక్క లక్షణాలు వ్యక్తిగత మరియు ఇంటర్-స్పెర్మ్‌లలో భిన్నమైనవి. ప్రస్తుత అధ్యయనం రియాక్టివ్ బ్లూ 2 (RB2) యొక్క కొన్ని ప్రత్యేక లక్షణాలను నివేదించింది. రంగు మానవ స్పెర్మ్ మరియు స్పెర్మాటిడ్ కోసం pH-ఆధారిత సెల్యులార్ విశిష్టతను ప్రదర్శించింది.

పదార్థాలు మరియు పద్ధతులు: మానవ స్పెర్మ్ మరియు స్పెర్మాటిడ్ pH 10.0 వద్ద RB2తో తడిసినవి.

ఫలితాలు: RB2 స్టెయిన్డ్ హ్యూమన్ స్పెర్మ్ మరియు స్పెర్మాటిడ్స్, ఇవి అపారదర్శక నీలిరంగు శరీరాలుగా కనిపించాయి, కానీ లింఫోసైట్‌లను మరక చేయలేదు, అయితే లోపలి వాక్యూల్స్ టోన్‌లెస్ స్పాట్‌లుగా కనిపించాయి. RB2 స్టెయినింగ్ ప్రోటామినేషన్‌కు గురైన క్షీణించిన స్పెర్మాటిడ్‌లను కూడా వెల్లడించింది, కానీ తోక పొడిగింపుకు ముందే అరెస్టు చేయబడింది. అజోస్పెర్మిక్ వీర్యం నమూనాలలో ఎక్కువ భాగం (16/23 కేసులు) స్పెర్మ్ లేదా క్షీణించిన స్పెర్మాటిడ్‌లను కలిగి ఉన్నాయి. హెడ్ ​​అవుట్‌లైన్ మరియు వాక్యూల్స్ యొక్క లక్షణాలు వ్యక్తిగతంగా భిన్నమైనవి అయినప్పటికీ, 2.0 mmol/L డితియోథ్రెయిటాల్ సమక్షంలో RB2 మరక సార్వత్రికంగా రూపురేఖలను ఓవల్ ఆకారంలోకి మార్చింది మరియు వాటి అసలు లక్షణాలతో సంబంధం లేకుండా వాక్యూల్స్ అదృశ్యం కావడానికి దారితీసింది.

తీర్మానం: RB2లోని మూడు సల్ఫేట్ అవశేషాలు pH 10 వద్ద ఆర్గ్ ఆఫ్ ప్రోటామిన్స్‌లోని గ్వానిడైల్ అవశేషాలతో ఎంపిక చేసుకున్నాయి. సెల్యులార్ నిర్దిష్టత న్యూక్లియోప్రొటీన్‌ల ఆర్గ్ కంటెంట్ కారణంగా ఏర్పడింది. RB2 స్పెర్మ్ యొక్క హెడ్ అవుట్‌లైన్ మరియు అంతర్గత వాక్యూల్‌లను వెల్లడించింది మరియు ప్రొటామినేషన్‌కు గురైన స్పెర్మాటిడ్‌లను అరెస్టు చేసింది. డైసల్ఫైడ్ క్రాస్-లింకేజ్ యొక్క స్థానిక వైఫల్యం వాక్యూల్ నిర్మాణంలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుంది. RB2 స్టెయినింగ్ స్పెర్మియోజెనిసిస్‌ను అన్వేషించడానికి కొత్త పద్ధతులను తెరిచింది.