జర్నల్ ఆఫ్ క్లినికల్ అండ్ సెల్యులార్ ఇమ్యునాలజీ
అందరికి ప్రవేశం
ISSN: 2155-9899
ISSN: 2155-9899
స్టెఫానీ బ్రూనింగర్, జానీనా ఎర్ల్, క్లెమెన్స్ నేప్, సోఫీ గుంథర్, ఐవోన్నే రెగెల్, ఫ్రాంజ్ రోడెల్, ఉడో ఎస్ గైప్ల్, జున్ థోర్‌స్టెయిన్‌డోట్టిర్, లిడియా జియానిత్రపాని, అన్నే ఎమ్ డికిన్సన్ మరియు గాబ్రియెల్ ముల్తాఫ్
పెరిఫెరల్ సర్క్యులేషన్‌లో ఒత్తిడి-ప్రేరేపించగల హీట్ షాక్ ప్రోటీన్ 70 (Hsp70) యొక్క ఎలివేటెడ్ స్థాయిలు అనేక కణితి ఎంటిటీలకు నివేదించబడ్డాయి. ఈ ఫలితాలకు అనుగుణంగా, Hsp70 మెమ్బ్రేన్-పాజిటివ్ ట్యూమర్ కణాలు ఎక్సోసోమ్ లాంటి లిపిడ్ వెసికిల్స్‌లో Hsp70ని చురుకుగా విడుదల చేస్తాయని మేము చూపించాము. చాలా వాణిజ్య Hsp70 ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సేస్ (ELISAs) సీరంలో లిపోసోమల్ Hsp70ని గుర్తించడం కోసం ధృవీకరించబడనందున, lipHsp70 ELISA మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ cmHsp70.1ని డిటెక్షన్ రియాజెంట్‌గా ఉపయోగించి స్థాపించబడింది. ఈ యాంటీబాడీ సజీవ కణితి కణాలపై ఉచిత మరియు మెమ్బ్రేన్-బౌండ్ Hsp70ని గుర్తించినట్లు నివేదించబడింది.
ELISA యొక్క ధ్రువీకరణ 0.36-17.4 ng/ml ఏకాగ్రత పరిధిలో అధిక పరీక్ష ఖచ్చితత్వాన్ని మరియు సరళతను చూపించింది. బఫర్ మరియు సీరం నమూనాలలో స్పైక్డ్ Hsp70 యొక్క రికవరీ యొక్క పోలిక వాణిజ్య ELISAతో పోలిస్తే lipHsp70 ELISAని ఉపయోగించి గణనీయంగా మెరుగైన రికవరీని వెల్లడించింది. లిపిడ్-అనుబంధ Hsp70కి సంబంధించి వాణిజ్య ELISAతో పోలిస్తే lipHsp70 ELISAతో పదిరెట్లు అధిక రికవరీ కనుగొనబడింది. ఆరోగ్యకరమైన మానవ స్వచ్ఛంద సేవకుల రక్త నమూనాల విశ్లేషణ (n=114) lipHsp70 మరియు నియంత్రణ ELISAని ఉపయోగించి వరుసగా 6.4 ± 2.7 మరియు 2.8 ± 1.3 ng/ml యొక్క సగటు సీరం Hsp70 గాఢతను వెల్లడించింది. Hsp70 సీరం స్థాయిలలో ముఖ్యమైన వయస్సు-సంబంధిత తేడాలు ఏవీ కనుగొనబడలేదు. lipHsp70 ELISA సీరం మరియు ప్లాస్మాకు సమానంగా సరిపోతుంది మరియు కొలిచిన Hsp70 సాంద్రతలు ఆహారం తీసుకోవడం, పదేపదే గడ్డకట్టడం మరియు నమూనా లేదా మితమైన హేమోలిసిస్ కరిగించడం ద్వారా ప్రభావితం కాలేదు. తల మరియు మెడ, ఊపిరితిత్తులు, కొలొరెక్టల్, ప్యాంక్రియాటిక్ క్యాన్సర్, గ్లియోబ్లాస్టోమా లేదా హెమటోలాజికల్ ప్రాణాంతకత మరియు ఆరోగ్యకరమైన మానవ వాలంటీర్లు ఉన్న రోగులలో Hsp70 స్థాయిల పోలిక కణితి రోగులలో గణనీయంగా అధిక స్థాయిలను వెల్లడించింది.
సారాంశంలో, సీరం మరియు ప్లాస్మాలో లిపోసోమల్ మరియు ఉచిత Hsp70ని కొలవడానికి lipHsp70 ELISA అత్యంత సున్నితమైన మరియు బలమైన పద్ధతిని అందిస్తుంది మరియు తద్వారా కణితిని గుర్తించడానికి మరియు రోగుల క్లినికల్ ఫలితాన్ని పర్యవేక్షించడానికి ఉపయోగకరమైన సాధనాన్ని అందిస్తుంది.