జర్నల్ ఆఫ్ సెల్ సైన్స్ & థెరపీ
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

న్యూక్లియోలిన్ Hsp72 ను ప్లాస్మా మెమ్బ్రేన్ ప్రిపరేటరీ నుండి మైక్రో ఎన్విరాన్‌మెంట్‌లోకి విడుదల చేస్తుంది

అప్పుకుట్టన్ NR ప్రదీప్, అలెగ్జాండర్ అసియా మరియు పునీత్ కౌర్

పర్పస్: క్లాసికల్ ప్రోటీన్ ట్రాన్స్‌పోర్ట్ పాత్వే నుండి స్వతంత్రంగా ఉండే మెకానిజం ద్వారా థర్మల్ స్ట్రెస్ కణాల నుండి Hsp72 విడుదలను ప్రేరేపిస్తుందని మా మునుపటి అధ్యయనాలు నిరూపించాయి. అయినప్పటికీ, Hsp72, లీడర్‌లెస్ ప్రొటీన్, ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ పరిసరాలకు ప్రాప్యతను పొందే ఖచ్చితమైన విధానం తెలియదు. మెటీరియల్స్ మరియు పద్ధతులు: ఈ అధ్యయనం కణాంతర Hsp72 ట్రాఫికింగ్ మరియు విడుదల జరిగే యంత్రాంగాన్ని గుర్తించడానికి రూపొందించబడింది. ఈ అధ్యయనంలో సమర్పించబడిన డేటా వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ మరియు ఫ్లో సైటోమెట్రీని ఉపయోగించి కణాంతర Hsp72 అక్రమ రవాణాను సూచిస్తుంది. అలాగే, ఇన్-జెల్ జీర్ణక్రియ మరియు LC-MS/MS చేయడంలో తెలియని మెమ్బ్రేన్ బౌండ్ ప్రోటీన్‌లు గుర్తించబడ్డాయి. ఫలితాలు: హీట్ షాక్ ట్రీట్‌మెంట్‌కు కణాలను మొదటిసారి బహిర్గతం చేసిన 60 నిమిషాలలో, ప్లాస్మా మెమ్బ్రేన్ బౌండ్ Hsp72 షెడ్ చేయబడిందని మరియు సైటోసోలిక్ కంపార్ట్‌మెంట్‌లుగా పునఃపంపిణీ చేయబడుతుందని మేము నిరూపిస్తున్నాము. సైటోచలాసిన్ Bతో కణాల ముందస్తు చికిత్స ద్వారా క్రియాశీల కణ రవాణా నిరోధం ప్లాస్మా పొర నుండి సైటోసోల్‌లోకి Hsp72 పునఃపంపిణీని పూర్తిగా రద్దు చేసింది. Hsp72తో ప్లాస్మా మెమ్బ్రేన్ బౌండ్ ప్రొటీన్‌ల క్రాస్-లింకింగ్ తర్వాత వెస్ట్రన్ బ్లాట్ అనాలిసిస్ మరియు LC-MS/MS విశ్లేషణలు Hsp72తో కనీసం ఏడుగురు ఇంటరాక్టింగ్ భాగస్వాములను వెల్లడించాయి, వీటిలో న్యూక్లియోలిన్, Hsp90, gp96, CAP2, TLR2, 4 మరియు 7. కణాల బదిలీ nucleolin-siRNA పూర్తిగా బేస్‌లైన్‌ను నిరోధించింది మరియు వేడి షాక్‌ప్రేరిత Hsp72 విడుదల. తీర్మానాలు: కలిసి తీసుకుంటే, ప్లాస్మా పొర Hsp72 కోసం రిజర్వాయర్‌గా పనిచేస్తుందని మరియు Hsp72 ట్రాఫికింగ్ మరియు విడుదలలో న్యూక్లియోలిన్ ముఖ్యమైన పాత్ర పోషిస్తుందని ఈ అధ్యయనం మొదటిసారి చూపిస్తుంది.