జర్నల్ ఆఫ్ క్లినికల్ అండ్ సెల్యులార్ ఇమ్యునాలజీ
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

miR-24 మాక్రోఫేజ్ పోలరైజేషన్ మరియు ప్లాస్టిసిటీని నియంత్రిస్తుంది

జెజ్రోమ్ బి. ఫోర్ధమ్, అఫ్సర్ ఆర్. నఖ్వీ మరియు సాల్వడార్ నరెస్

లక్ష్యం: మైక్రోఆర్ఎన్ఏలు (మిఆర్ఎన్ఎ) మానవ జీవశాస్త్రం మరియు రోగనిరోధక శక్తి యొక్క సర్వవ్యాప్త నియంత్రకాలు. ఇంతకుముందు, మేము ఎస్చెరిచియా కోలి మరియు స్టెఫిలోకాకస్ ఆరియస్ బయోపార్టికల్స్ యొక్క ఫాగోసైటోసిస్‌లో miR-24 కోసం నిరోధక పాత్రను ప్రదర్శించాము మరియు అదే మూలానికి చెందిన లిపోపాలిసాకరైడ్ (LPS)కి ప్రతిస్పందనగా సైటోకిన్ స్రావం యొక్క ప్రేరణ; అలాగే, మేము పీరియాంటోపతిక్ పాథోజెన్స్ (Aa) మరియు పోర్ఫిరోమోనాస్ గింగివాలిస్ (Pg) నుండి LPSకి భిన్నమైన మరియు కన్వర్జెంట్ miRNA ప్రతిస్పందనలను గుర్తించాము మరియు Pg LPS స్ట్రక్చర్ (Pg. CSE) ప్రభావం miRNA ప్రతిస్పందనను ప్రభావితం చేసే పర్యావరణ మాడిఫైయర్‌గా సిగరెట్ పొగ సారాన్ని వెల్లడించాము. మాక్రోఫేజ్ పోలరైజేషన్ మరియు ప్లాస్టిసిటీపై miR-24 పాత్రను పరిశోధించడానికి ఈ అధ్యయనం రూపొందించబడింది.

పద్ధతులు: ప్రాథమిక మానవ మాక్రోఫేజ్‌లు MACS సానుకూల ఎంపిక ద్వారా పరిధీయ రక్త మోనోన్యూక్లియర్ కణాల (PBMCలు) నుండి వేరుచేయబడిన CD14+ మోనోసైట్‌ల నుండి వేరు చేయబడ్డాయి మరియు miR-24 miRNA అనుకరణలు, నిరోధకాలు లేదా ప్రతికూల నియంత్రణ అనుకరణతో బదిలీ చేయబడ్డాయి; మాక్రోఫేజ్ యాక్టివేషన్ యొక్క కీలక దశలను సూచించే వివిధ పరిస్థితులలో సైటోకిన్‌లు మరియు/లేదా LPSతో ఉద్దీపన తర్వాత. సైటోకిన్ ఉత్పత్తి (ELISA) మరియు ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ (ఫ్లో సైటోమెట్రీ, ఇమ్యునోబ్లోట్) కోసం పరీక్షలను ఉపయోగించి మాక్రోఫేజ్ యాక్టివేషన్ మరియు పోలరైజేషన్ అంచనా వేయబడింది. MiR-24 వ్యక్తీకరణను RT-PCR అంచనా వేసింది.

ఫలితాలు: Aa, Pg మరియు Pg CSE మూలం యొక్క LPSలతో మాక్రోఫేజ్‌ల ఉద్దీపన సైటోకిన్ వ్యక్తీకరణ యొక్క అసమాన స్థాయిలు మరియు miR-24 యొక్క అవకలన వ్యక్తీకరణకు దారితీసింది. miR-24 యొక్క అధిక ప్రసరణ LPSకి ప్రతిస్పందనగా సైటోకిన్ స్రావాన్ని నిరోధించింది. ఇంటర్ఫెరాన్ గామా (IFN-γ)తో మాక్రోఫేజ్‌ల ప్రైమింగ్ ఈ నిరోధక ప్రభావాన్ని అధిగమించలేదు, అయితే IFN-γ ప్లస్ TNF-α, TNF-β, లేదా IL-17తో మాక్రోఫేజ్‌ల క్లాసికల్ యాక్టివేషన్, miR-24 మధ్యవర్తిత్వ అణచివేత నమూనాను మాడ్యులేట్ చేసింది. సైటోకిన్-నిర్దిష్ట పద్ధతిలో. ప్రత్యామ్నాయ మాక్రోఫేజ్ యాక్టివేషన్ సమయంలో miR-24 మెరుగుపరచబడిన CD206 నియంత్రణను అతిగా ఎక్స్‌ప్రెషన్ చేసింది మరియు మాక్రోఫేజ్ ప్రత్యామ్నాయం నుండి క్లాసికల్ యాక్టివేషన్ స్టేట్‌లకు మారడంలో దాని నియంత్రణను నిరోధించింది. miR-24 యొక్క అధిక ప్రసరణ ఫలితంగా క్లాస్ 1A PI 3-కినేస్ సబ్యూనిట్ p110 డెల్టా (p110δ) యొక్క వ్యక్తీకరణ తగ్గింది.

ముగింపు: LPSలో వ్యాధికారక- మరియు పర్యావరణ-నిర్దిష్ట మార్పులు మానవ మాక్రోఫేజ్‌లలో సైటోకిన్‌లు మరియు miR-24 యొక్క వ్యక్తీకరణను మారుస్తాయి. MiR-24 అనేది LPS ద్వారా మాక్రోఫేజ్ క్లాసికల్ యాక్టివేషన్ యొక్క ప్రతికూల నియంత్రకం మరియు ధ్రువణత మరియు ప్లాస్టిసిటీ పరిస్థితులలో ప్రత్యామ్నాయ క్రియాశీలతను ప్రోత్సహిస్తుంది. LPS ప్రేరిత సైటోకిన్ స్రావం యొక్క MiR-24 మధ్యవర్తిత్వ నిరోధం ఉద్దీపన సమయంలో మాక్రోఫేజ్ యాక్టివేషన్ స్థితిపై ఆధారపడి ఉంటుంది మరియు ఇది గ్రాహక బంధాన్ని సైటోకిన్ ఇండక్షన్‌గా మార్చే కణాంతర సిగ్నలింగ్ మార్గం/sలో p110δ పాల్గొనడం వల్ల కావచ్చు. మాక్రోఫేజ్‌లపై miR-24 ప్రభావంలో ముఖ్యమైన తేడాలు గమనించబడినప్పటికీ, ఈ డేటా miR-24 యొక్క అధిక ప్రసరణ ప్రధానంగా యాంటీ ఇన్‌ఫ్లమేటరీగా ఉంటుందని సూచిస్తుంది.