మెడికల్ డయాగ్నస్టిక్ మెథడ్స్ జర్నల్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

మానవ స్పెర్మ్‌లోని DNA యొక్క తక్కువ సాంద్రత ప్రాంతాలు రియాక్టివ్ బ్లూ 2తో అపారదర్శక మరక తర్వాత వాక్యూల్స్‌గా కనిపిస్తాయి

సత్రౌ కనెకో, జోజీ యోషిడా మరియు కియోషి తకమత్సు

మానవ స్పెర్మ్ తరచుగా వాక్యూల్‌లను కలిగి ఉంటుంది మరియు క్రోమోజోమ్ ప్రాంతంలోని వాక్యూల్స్ DNA క్షీణతకు కారణమా కాదా అని నిర్ధారించడం అవసరం. అందుకోసం, ప్రస్తుత అధ్యయనం వాక్యూల్స్ యొక్క విజువలైజేషన్ కోసం ఒక నవల క్లినికల్ ఎగ్జామినేషన్ టెక్నిక్, అపారదర్శక స్టెయినింగ్‌ను అభివృద్ధి చేసింది. అత్యంత పలచబరిచిన రియాక్టివ్ బ్లూ 2 (RB2, 100 pmol/L) టోన్‌లెస్ స్పాట్‌లతో అపారదర్శక నీలిరంగు శరీరాన్ని బహిర్గతం చేయడానికి స్పెర్మ్ తలపై మసకబారింది. డిఫరెన్షియల్ ఇంటర్‌ఫరెన్స్ కాంట్రాస్ట్ వాక్యూల్‌లను షేడెడ్-రిలీఫ్ ఇమేజ్‌లుగా చూపించింది. అదే విధంగా, వీక్షణ రంగంలో స్థానికీకరణ మరియు టోన్‌లెస్ స్పాట్‌ల ఆకారం షేడెడ్-రిలీఫ్ చిత్రాలతో సమానంగా ఉంటాయి.

RB2 మరియు DNA ఫ్లోరోసెంట్ డైతో డ్యూయల్ స్టెయినింగ్ వాక్యూల్స్‌లో ఖాళీ లేదా తక్కువ సాంద్రత కలిగిన DNA ఉండవచ్చునని సూచించింది. ప్రస్తుత ఫలితాలు క్లినికల్ అసిస్టెడ్ రిప్రొడక్టివ్ టెక్నాలజీ (ART)లో ముఖ్యమైన సమస్యలను బహిర్గతం చేశాయి, అంటే, అవుట్‌లైన్ లేదా చలనశీలత యొక్క సాధారణతతో సంబంధం లేకుండా అనేక రకాల వాక్యూల్స్ పాల్గొన్నాయి. లక్షణాలు మూడు వర్గాలుగా వర్గీకరించబడ్డాయి: సున్నా లేదా ఒక చిన్న వాక్యూల్; వివిధ పరిమాణాల బహుళ చెదురుమదురు వాక్యూల్స్; మరియు ఒక పెద్ద వాక్యూల్. అంతేకాకుండా, డెన్సిటీ గ్రేడియంట్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ మరియు తదుపరి స్విమ్ అప్ వంటి ఇన్ విట్రో ప్రాసెసింగ్ దశలు వాక్యూల్స్ లేకుండా స్పెర్మ్‌ను వేరు చేయలేవు.

వాక్యూల్‌లు కేవలం DNAని పాడుచేయకుండా పరిసరాల్లోకి నెట్టివేస్తాయా లేదా లేదా ఖాళీ ప్రాంతం DNA క్షీణత యొక్క పర్యవసానంగా ఉంటే, అవుట్‌లైన్ మరియు వాక్యూల్‌ల యొక్క ఏకకాల విజువలైజేషన్ కోసం అపారదర్శక మరక అనేది ప్రీ-ARTకి ఒక ప్రధాన దశ. స్పెర్మ్ జనాభా క్లినికల్ ICSIలో ఉపయోగించడానికి సమర్థంగా ఉందో లేదో తెలుసుకోవడానికి సైటో-డయాగ్నోసిస్.