ISSN: 1920-4159
మొహన్నాద్ ఐడ్రెస్, మహమ్మద్ సలీం, ఆసియా ఎల్-హసన్
ఈ అధ్యయనం పచ్చి మిరపకాయల నుండి సహజంగా లభించే L-గ్లుటామినేస్ను యాంటీ-ల్యుకేమిక్ ఔషధంగా అభివృద్ధి చేసే సామర్థ్యాన్ని అన్వేషించడం లక్ష్యంగా పెట్టుకుంది, ఇది ఇతర ఎంపిక చేయని కెమోథెరపీటిక్స్లా కాకుండా క్యాన్సర్ కణ జీవక్రియను ఎంపిక చేస్తుంది. పాక్షిక శుద్దీకరణ మరియు ఇన్ విట్రో సైటోటాక్సిసిటీ అస్సే తర్వాత దాని నిర్దిష్ట కార్యాచరణ మరియు ఎల్-గ్లుటామినేస్ కార్యాచరణకు సరైన స్థితిని నిర్ణయించడం ద్వారా ఇది జరిగింది. లిక్విడ్ నైట్రోజన్లో సజాతీయీకరణ మరియు 0.05 M సోడియం బోరేట్ బఫర్ (pH 8.5)తో వెలికితీసిన తర్వాత నెస్లరైజేషన్ పద్ధతి ద్వారా పండ్ల సజల సారంలో Lglutaminase యొక్క కార్యాచరణను కొలుస్తారు. మొత్తం ప్రోటీన్ యొక్క మిల్లీగ్రాముకు Lglutaminase చర్య 18.7 U/mg అని ఫలితాలు చూపించాయి. మిరప పండ్ల నుండి సేకరించిన ముడి ఎల్-గ్లుటామినేస్ యొక్క ఉత్ప్రేరక చర్యకు అనుకూలమైన పరిస్థితులు అధ్యయనం చేయబడ్డాయి. pH 7.2 వద్ద ఫాస్ఫేట్ బఫర్డ్ సెలైన్ సమక్షంలో 30 నిమిషాల పాటు 37 ° C వద్ద ఎంజైమ్ 250 mM l-గ్లుటామైన్తో పొదిగినప్పుడు L-గ్లుటామినేస్ యొక్క గరిష్ట కార్యాచరణ సాధించబడిందని ఫలితాలు చూపించాయి. L-gutaminase గరిష్ట వేగం (Vmax) మరియు అనుబంధ స్థిరాంకం (Km) వరుసగా 14.1 mM మరియు 90.2 mM. క్రూడ్ L-గ్లుటామినేస్ 20% నుండి 80% సంతృప్తత వరకు అమ్మోనియం సల్ఫేట్ యొక్క ఏడు వేర్వేరు సాంద్రతలను ఉపయోగించి ఉప్పు వేయడం ద్వారా శుద్ధి చేయబడింది. 50% అమ్మోనియం సల్ఫేట్ ద్రావణంలో ఉప్పు వేయబడినప్పుడు శుద్ధి చేయబడిన L-గ్లుటామినేస్ యొక్క నిర్దిష్ట కార్యాచరణ 18.7 నుండి 98.5 U/mgకి పెరిగింది. ఈ ఫలితం అమ్మోనియం సల్ఫేట్ అవపాతం యొక్క అధిక సామర్థ్యాన్ని శుద్దీకరణ సాంకేతికతగా సూచించింది. L-గ్లుటామినేస్ యొక్క సైటోటిక్సిటీని డోక్సోరోబిసిన్తో పోల్చడం ద్వారా మరియు వాటిని THP-1 సెల్ లైన్కు వ్యతిరేకంగా MTT పరీక్ష ద్వారా కలపడం ద్వారా యాంటీ-ల్యుకేమిక్ ఆస్తిని అంచనా వేయడం జరిగింది. ఎంజైమ్తో పోల్చినప్పుడు (60.28%) ఎంజైమ్ను డోక్సోరోబిసిన్తో కలిపిన సందర్భంలో 72.75% నిరోధిత శాతంతో గణనీయమైన క్యాన్సర్ వ్యతిరేక చర్యను ఫలితాలు చూపించాయి. పచ్చి మిరపకాయల ఎల్-గ్లుటామినేస్ మిరపకాయలలో అధిక కంటెంట్, శుద్దీకరణ సౌలభ్యం మరియు హ్యూమన్ మోనోసైటిక్ లుకేమియా కణాలకు వ్యతిరేకంగా సైటోటాక్సిసిటీని కలిగి ఉండటం వల్ల యాంటీ-ల్యుకేమిక్ ఏజెంట్గా అభివృద్ధి చేయవచ్చని ఈ పరిశోధనలు నిర్ధారించాయి.