యాంటీవైరల్స్ & యాంటీరెట్రోవైరల్స్ జర్నల్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

కాలిబ్రచోవా మోటిల్ వైరస్ (CbMV) యొక్క ఇన్ఫెక్షియస్ ఫుల్-లెంగ్త్ క్లోన్స్

అంజు గులాటి-సఖుజా మరియు హ్సింగ్-యే లియు

కాలిబ్రాచోవా మోటిల్ వైరస్ (CbMV) యొక్క జన్యుసంబంధమైన RNA (gRNA) మరియు సబ్జెనోమిక్ RNAలు (sgRNAలు) నుండి తీసుకోబడిన పూర్తి-నిడివి గల cDNA క్లోన్‌లు T7 RNA ప్రమోటర్ నియంత్రణలో నిర్మించబడ్డాయి మరియు ప్లాస్మిడ్ pUC-18లోకి లిగేట్ చేయబడ్డాయి. పూర్తి నిడివి గల జెనోమిక్ cDNA క్లోన్ pUC-CbMV-FL నుండి సంశ్లేషణ చేయబడిన క్యాప్డ్ మరియు అన్‌క్యాప్డ్ ఇన్ విట్రో ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్‌లు టీకాలు వేసిన తర్వాత 10 నుండి 15 రోజులలోపు మెకానికల్ ఇనాక్యులేటెడ్ చెనోపోడియం క్వినోవాపై క్లోరోటిక్ స్థానిక గాయాలను ఉత్పత్తి చేస్తాయి. టీకాలు వేయబడిన రోగలక్షణ ఆకుల నుండి కోలుకున్న సంతాన వైరియన్లు తల్లిదండ్రుల వైరియన్ల వలె అదే పదనిర్మాణ లక్షణాలను కలిగి ఉంటాయి. ఈ వైరియన్‌లు డబుల్ యాంటీబాడీ శాండ్‌విచ్ ఎంజైమ్-లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (DAS-ELISA)లో CbMV యాంటిసెరమ్‌తో సానుకూలంగా ప్రతిస్పందిస్తాయి మరియు పాశ్చాత్య బ్లాటింగ్ ద్వారా వైరల్ కోట్ ప్రోటీన్ కనుగొనబడింది. CbMV జన్యువుపై ఐదు ఓపెన్ రీడింగ్ ఫ్రేమ్‌ల (ORFలు) ఉనికి మరియు gRNA మరియు sgRNAల ద్వారా సంబంధిత ప్రోటీన్‌ల సంశ్లేషణ ఉత్తర బ్లాటింగ్ మరియు ఇన్ విట్రో ట్రాన్స్‌లేషన్ ద్వారా నిర్ధారించబడ్డాయి. CbMV యొక్క మూడు sgRNAల ట్రాన్స్క్రిప్షన్ ప్రారంభ సైట్ కూడా నిర్ణయించబడింది. CbMV యొక్క పూర్తి-నిడివి ఇన్ఫెక్షియస్ cDNA క్లోన్ యొక్క విజయవంతమైన నిర్మాణం ఈ వైరస్ యొక్క జన్యు విధులను అర్థం చేసుకోవడానికి ఉపయోగించే పరమాణు సాధనాలను అభివృద్ధి చేయడం సాధ్యపడుతుంది.