బయాలజీ & మెడిసిన్లో అధునాతన సాంకేతికతలు
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

బయోలాజికల్ శాంపిల్స్‌లో అట్రాక్టిలోడ్స్ లాన్సియా మరియు దాని బయోయాక్టివ్ కాంస్టిట్యూయెంట్ అట్రాసైలోడిన్ యొక్క బయోయాక్టివిటీని నిర్ణయించడానికి హై-త్రూపుట్ బయోఅసే మరియు HPLC-UV పద్ధతులు : అధునాతన-దశ చోలాంగియోకార్సినోమా ఉన్న రోగులలో ఫార్మకోకైనటిక్ అధ్యయనం కోసం దరఖాస్తు

అనురక్ చెయోమాంగ్, నడ్డా ముహమ్మద్, ఇంథూన్ కులమా, కేసర నా-బాంగ్‌చాంగ్*

మానవ సీరం నమూనాలలో అట్రాక్టిలోడ్స్ లాన్సియా (AL) యొక్క మొత్తం బయోయాక్టివిటీని నిర్ణయించడానికి అధిక-నిర్గమాంశ బయోఅస్సే పద్ధతిని ఏర్పాటు చేయడం ఈ అధ్యయనం లక్ష్యం . అదనంగా, AL యొక్క ప్రధాన బయోయాక్టివ్ భాగం అయిన అట్రాక్టిలోడిన్ (ATD) యొక్క ప్లాస్మా సాంద్రతలను నిర్ణయించడానికి ఒక సాధారణ HPLC-UV పద్ధతి కూడా అభివృద్ధి చేయబడింది. బయోఅస్సే పద్ధతి కోసం, స్టెఫిలోకాకస్ ఆరియస్ (S. ఆరియస్) ATCC 25923 స్ట్రెయిన్ పరీక్ష జీవిగా ఉపయోగించబడింది. MTT పరీక్షను ఉపయోగించి బ్యాక్టీరియా పెరుగుదల నిరోధం అంచనా వేయబడింది. సీరం (0, 0.39, 0.78, 1.56, 3.13, 2.56, మరియు 50 ng/ µl)లోని ఏకాగ్రత ప్రతిస్పందన వక్రరేఖ నుండి అమరిక వక్రరేఖ తయారు చేయబడింది, ఇది 0.990 కంటే మెరుగైన సహసంబంధ గుణకాలతో సరళంగా ఉంటుంది. 20 µl సీరం నమూనాలను ఉపయోగించి పరిమాణ పరిమితి (LOQ) 1.66 µg/ml. HPLC-UV పరీక్షా విధానం హైపర్‌సిల్ గోల్డ్ C18 కాలమ్ మరియు 70:30 (v:v) నిష్పత్తిలో అసిటోనిట్రైల్ మరియు నీటిని కలిగి ఉండే ఎల్యూషన్ ద్రావకం ఉపయోగించి రివర్స్‌డ్-ఫేజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ ఆధారంగా అభివృద్ధి చేయబడింది. UV డిటెక్షన్ 340 nm తరంగదైర్ఘ్యం వద్ద సెట్ చేయబడింది. సీరం (0, 0.39, 0.78, 1.56, 3.13, 2.56, మరియు 50 ng/µl)లోని ఏకాగ్రత-ప్రతిస్పందన వక్రరేఖ నుండి అమరిక వక్రరేఖ తయారు చేయబడింది, ఇది 0.990 కంటే మెరుగైన సహసంబంధ గుణకాలు (r)తో సరళంగా ఉంటుంది. 1 ml ప్లాస్మా నమూనాను ఉపయోగించి LOQ 2.5 ng/ml. రెండు పరీక్షా పద్ధతులు AL యొక్క సీరం బయోయాక్టివిటీ మరియు ATD యొక్క ప్లాస్మా సాంద్రతల యొక్క నిర్దిష్ట, సున్నితమైన, ఖచ్చితమైన మరియు పునరుత్పాదక పరిమాణాత్మక విశ్లేషణలు. అధునాతన-దశ కోలాంగియోకార్సినోమా ఉన్న ఐదుగురు రోగులలో AL సారం యొక్క మొత్తం బయోయాక్టివిటీ (యాంటీకోలాంగియోకార్సినోమా యాక్టివిటీ) యొక్క ఫార్మకోకైనటిక్ అధ్యయనం కోసం పద్ధతులు విజయవంతంగా వర్తించబడ్డాయి.