ఇంటర్నల్ మెడిసిన్: ఓపెన్ యాక్సెస్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

యురేట్ ఆక్సిడేస్‌ను ఉత్పత్తి చేయగల బాక్టీరియా యొక్క జన్యు ఇంజనీరింగ్

జిన్ చెంగ్, బో యాంగ్, డాంగ్ లియు, ఎల్ జువాన్ హే, గాన్ చెన్, యోంగ్ చెన్, ఆర్ ఫా హువాంగ్ మరియు వై షెంగ్ జియాంగ్

యురేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యువును లాక్టోబాసిల్లస్ బల్గేరియాలోకి క్లోన్ చేసి యూరిక్ యాసిడ్‌ను కుళ్ళిపోవడానికి మరియు హైపర్‌యూరిసెమియాకు చికిత్స చేయడానికి యురేట్ ఆక్సిడేస్‌ను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. జెన్‌బ్యాంక్‌లో కాండిడా యుటిలిస్ యురేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యు శ్రేణులను (యూరికేస్, ఇ12709) ఉపయోగించి, పిసిఆర్-యాంప్లిఫైడ్ యురేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యు శకలాలు ప్లాస్మిడ్ pMG36eలోకి చొప్పించబడ్డాయి, ఇది రీకాంబినెంట్ ప్లాస్మిడ్ PMG36e-U లోకి తిరిగి సంయోగం చేయబడిన ప్లాస్మిడ్ PMG36e-U లోకి రూపొందించబడింది. బల్గేరియా జన్యుపరంగా ఇంజనీరింగ్ చేయబడిన బ్యాక్టీరియా యొక్క సెల్ లైసేట్‌లలో యురేట్ ఆక్సిడేస్‌ను గుర్తించడానికి మరియు యురేట్ ఆక్సిడేస్ కార్యాచరణను కొలవడానికి మేము SDS-PAGEని ఉపయోగించాము. యురేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యువు కాండిడా యుటిలిస్ జన్యువు నుండి PCR-విస్తరింపబడింది. యూరేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యువును కలిగి ఉన్న రీకాంబినెంట్ ప్లాస్మిడ్ PMG36e-U విజయవంతంగా లాక్టోబాసిల్లస్ బల్గేరియాగా ఎలక్ట్రోట్రాన్స్‌ఫార్మ్ చేయబడింది. జన్యుపరంగా ఇంజనీరింగ్ చేయబడిన బ్యాక్టీరియా ద్వారా సంశ్లేషణ చేయబడిన యురేట్ ఆక్సిడేస్ సబ్యూనిట్ యొక్క పరమాణు బరువు SDS-PAGE ఆధారంగా సుమారు 34 KD, మరియు బ్యాక్టీరియా తయారీ నుండి ఇన్ విట్రో ఎంజైమాటిక్ చర్య 0.33 u/mL వరకు ఉంటుంది. తీర్మానం: యురేట్ ఆక్సిడేస్ జన్యువు లాక్టోబాసిల్లస్ బల్గేరియాలోకి క్లోన్ చేయబడింది మరియు యూరిక్ యాసిడ్ విజయవంతంగా కుళ్ళిపోయింది.