ISSN: 2471-9315
ఐలీ జాంగ్, యుహాన్ గావో, జింగ్జి లి మరియు హాంగ్సింగ్ జిన్
లక్ష్యాలు: ఐసోబుటానాల్ దాని అధిక ఆక్టేన్ సంఖ్య మరియు ఇథనాల్ కంటే అధిక శక్తి సాంద్రత కోసం తదుపరి తరం జీవ ఇంధనంగా పరిగణించబడుతుంది. అయినప్పటికీ, ఐసోబుటానాల్ బయోసింథసిస్ సమయంలో, ఇథనాల్ మరియు గ్లిసరాల్ ప్రధాన అవాంఛిత ఉపఉత్పత్తులు. Saccharomyces cerevisiaelo ఐసోబుటానాల్ ఉత్పత్తిని రీడ్ చేయడానికి, మేము ఇథనాల్ మరియు గ్లిసరాల్ టైటర్లను తొలగించడానికి మాలిక్యులర్ బయాలజీ మరియు జెనెటిక్ కాంబినేషన్ టెక్నాలజీలను ఉపయోగించాము.
పద్ధతులు: ఈ అధ్యయనంలో, GPD2 మరియు PDC6 సచ్చరోమైసెస్ సెరెవిసియా యొక్క మైక్రోఎరోబిక్ కిణ్వ ప్రక్రియలో ఐసోబుటానల్ ఉత్పత్తిని పెంచడానికి తొలగించబడ్డాయి. ఇంజినీర్డ్ స్ట్రెయిన్ HZAL–13 (PGK1p–BAT2 gpd2Δ::RYUR) BAT2 (బ్రాంచ్-చైన్ అమినో-యాసిడ్ అమినోట్రాన్స్ఫేర్స్ను ఎన్కోడ్ చేస్తుంది) మరియు GPD2 (ఇది గ్లిసరాల్-3-ఫాస్ఫేట్నిహైడ్రోజినెస్ప్రెట్నిడ్నిహైడ్రోజినెస్ప్రెట్ని నిర్మించింది. ఇంజినీర్డ్ స్ట్రెయిన్ HZAL–14 (PGK1p–BAT2 pdc6Δ::R gpd2Δ::RYUR) HZAL–13 pILV2లో PDC6 (పైరువేట్ డెకార్బాక్సిలెస్ను ఎన్కోడ్ చేస్తుంది)ను మరింత తొలగించడం ద్వారా పొందబడింది. అప్పుడు మేము ఇంజనీరింగ్ జాతులు మరియు జాతి నియంత్రణ యొక్క కిణ్వ ప్రక్రియ పనితీరును పరీక్షించాము. మైక్రోఏరోబిక్ కిణ్వ ప్రక్రియ సమయంలో, 48 గంటల పాటు 100 మి.లీ మీడియంతో 100 రెవ్/నిమిషానికి స్థిరంగా కదిలే వేగంతో ఉంచబడిన అన్బఫ్డ్ షేక్ ఫ్లాస్క్లలో 30 ° C వద్ద సంస్కృతిని ప్రదర్శించారు.
ఫలితాలు: కంట్రోల్ స్ట్రెయిన్ యొక్క ప్రామాణిక ఐసోబుటానాల్ టైటర్లు, HZAL-13 pILV2 మరియు HZAL-14 pILV2 వరుసగా 29.8 mg/l, 162.3 mg/l మరియు 309.3 mg/l. PDC6 మరియు GPD2లను తొలగించడం ద్వారా గ్లిసరాల్ ఏర్పడటం మరియు ఇథనాల్ బయోసింథసిస్ తగ్గడం S. సెరెవిసియాలో ఐసోబుటానాల్ టైటర్ను నాటకీయంగా పెంచుతుందని ఈ ఫలితాలు చూపిస్తున్నాయి.
తీర్మానం: ఐసోబుటానాల్ బయోసింథసిస్ పాత్వేలో సంబంధిత జన్యువుల యొక్క అతిగా ఎక్స్ప్రెషన్ మరియు గ్లిసరాల్ మరియు ఇథనాల్ బయోసింథసిస్ను ఎన్కోడ్ చేసే కీన్లను తొలగించడం అనేది సాక్రోరోమైసెస్ సెవిసియాలో ఐసోబుటానాల్ టైటర్ను పెంచడానికి ఒక మంచి వ్యూహం.