ఆండ్రాలజీ-ఓపెన్ యాక్సెస్
అందరికి ప్రవేశం
ISSN: 2167-0250
ISSN: 2167-0250
దేబ్జానీ నాథ్ మరియు మిథున్ షా
లక్ష్యం: కాప్రైన్ (కాప్రా ఇండికస్) స్పెర్మటోజోవా వారి పొర ఉపరితలంపై ఒక నవల ఎక్టో-cAMP స్వతంత్ర ప్రోటీన్ కినేస్ (ఎక్టో-CIK) కలిగి ఉంటుంది. ఈ ఎంజైమ్ ఎపిడిడైమిస్‌లో స్పెర్మాటోజోవా యొక్క పరిపక్వ ప్రక్రియ ద్వారా విశేషమైన మార్పును చూపించింది. [Ca2+] కణాంతర స్థాయిని నియంత్రించడం ద్వారా ఎపిడిడైమల్ స్పెర్మటోజోవా యొక్క ఫార్వర్డ్ మోటిలిటీని నియంత్రించడంలో CIK పాత్రను మేము పరిశోధించాము.
విధానం: కౌడా ఎపిడిడైమల్ పరిపక్వ స్పెర్మ్ కణాలు CIK యాంటీబాడీతో చికిత్స చేయబడ్డాయి మరియు 120 నిమిషాల ఎక్స్పోజర్ వద్ద ఎంజైమ్ కార్యకలాపాల గరిష్ట నిరోధం (85%) గమనించబడింది. కాల్షియం తీసుకునే మెకానిజమ్‌లను విశ్లేషించడానికి, CIK యాంటీబాడీతో చికిత్స చేసిన తర్వాత కణాలు 45Ca2+కి బహిర్గతమయ్యాయి మరియు వివిధ కాల్షియం ఛానల్ రెగ్యులేటర్‌లతో ముందే చికిత్స చేయబడ్డాయి. కణాంతర [Ca2+]i సిగ్నల్ ఫ్యూరా 2-AM ఉపయోగించి ఫ్లోరోమెట్రిక్‌గా నిర్ణయించబడింది. ఫార్వర్డ్ మోటిలిటీ శాతాన్ని కొలవడానికి కంప్యూటరైజ్డ్ స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్ అస్సే పద్ధతి ఉపయోగించబడింది.
ఫలితం: ప్లాస్మా పొర యొక్క L-రకం వోల్టేజ్-ఆధారిత Ca2+ ఛానెల్‌ల ద్వారా కాల్షియం తీసుకోవడం CIKచే నియంత్రించబడుతుందని చూపబడింది. వరపామిల్ (20 μM), నిఫెడిపైన్ (20 μM) తో స్పెర్మ్ కణాల ముందస్తు చికిత్స CIK యాంటీబాడీ ద్వారా పెరిగిన కణాంతర [Ca2+]iని గణనీయంగా నిరోధించింది. అయితే కాల్మోడ్యులిన్ విరోధులు ట్రిఫ్లోపెరాజైన్ మరియు w13 (N-(4-అమినోబ్యూటిల్)-5-క్లోరో-2 నాఫ్తలెనెసల్ఫోనామైడ్ హైడ్రోక్లోరైడ్ మరియు సోడియం అజైడ్, ఒక శక్తివంతమైన మైటోకాన్డ్రియల్ ఇన్హిబిటర్, ఈ కాల్షియం ప్రవేశంపై ఎటువంటి ప్రభావాన్ని చూపలేదు. కణాలు ఛానెల్‌ని చూపించాయి CIK-యాంటీబాడీ చికిత్స చేసిన స్పెర్మాటోజోవా యొక్క ఫార్వర్డ్ మోటిలిటీని తగ్గించడంలో వెరాపామిల్ (20 μM) ముఖ్యమైన పాత్రను కలిగి ఉందని గమనించబడింది
. స్పెర్మటోజో మరియు నియంత్రణ పాక్షికంగా సక్రియం చేయబడవచ్చు కణాంతర [Ca2+]i స్థాయి వోల్టేజ్ గేటెడ్ L రకం కాల్షియం ఛానెల్ ద్వారా క్రియాత్మకంగా అందించబడుతుంది.