ఎంజైమ్ ఇంజనీరింగ్
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

ఎంజైమ్ ద్వారా జన్యు ఉత్పరివర్తనాలను కనుగొనడం: ఒక సాధారణ మరియు అత్యంత సున్నితమైన ఎంజైమ్ సరిపోలని క్లీవేజ్ పద్ధతి కోసం చిప్స్

వోస్కరైడ్స్ కె

అస్పష్టమైన DNA రకాలు యొక్క హామీ అణు శాస్త్రం యొక్క అనేక రంగాలలో అర్ధవంతమైన విషయాలలో ఒకటి. ఈ కారణంగా సాంగర్ సీక్వెన్సింగ్ రోజువారీ అభ్యాసానికి ఉపయోగించబడింది. మీరు భారీ అంచనా వేసిన DNA లేదా సమృద్ధిగా ఉన్న ఉదాహరణలను చూడవలసి వచ్చినప్పుడు, ఈ వ్యూహం సమస్యాత్మకమైనది, ఖరీదైనది మరియు దుర్భరమైనది. ఆలస్యంగా, ఫ్యూచర్ సీక్వెన్సింగ్ (NGS) మార్పు స్క్రీనింగ్ వెనుక విభిన్న ప్రేరణలలో ఉపయోగించబడింది. ఈ అపారమైన సీక్వెన్సింగ్ ఆవిష్కరణ జీనోమ్ సైజ్ స్క్రీనింగ్ పరిమాణానికి సముచితమైనది, తులనాత్మక సముదాయాలకు కారణమయ్యే లక్షణాల తగ్గింపును స్క్రీన్ చేయడానికి, ఉదాహరణకు, యువతలో మధుమేహం (MODY) అభివృద్ధి ప్రారంభమవుతుంది. ఒక క్షణం ఆలస్యం లేకుండా తగినంత ఉదాహరణలు సమీకరించబడే అవకాశం ఉన్నట్లయితే, NGS అనేది ఒక ఉల్లాసకరమైన, ఆకర్షణీయమైన వ్యవస్థ, పరీక్షల పూలింగ్ ఒక పరీక్షకు నడుస్తున్న ధరను తగ్గిస్తుంది. అయితే, మీరు ఒకే ట్రయల్ ద్వారా 10~50 kb DNA సమూహాన్ని తనిఖీ చేయాలని భావిస్తున్నప్పుడు, మీకు ఉత్పాదక మరియు సహాయక స్క్రీనింగ్ వ్యూహం అవసరం. సాధారణంగా, సింగిల్-స్ట్రాండ్ అడాప్టేషన్ పాలిమార్ఫిజం (SSCP) కూడా, హెటెరోడుప్లెక్స్ ఇన్వెస్టిగేషన్ (HA) ఈ కారణంగా సాధారణంగా ఉపయోగించే పద్ధతులు. ఏదేమైనప్పటికీ, ఈ పద్ధతుల యొక్క ప్రభావశీలత క్షుణ్ణంగా విచారణకు ఆమోదయోగ్యం కాదు. మార్చబడిన PCR ఆధారిత పరివర్తన స్క్రీనింగ్ వ్యూహాలలో గణనీయమైన సంఖ్యలో పంపిణీ చేయబడినప్పటికీ, తక్కువ ప్రభావం లేదా సంభావ్య భారం కారణంగా వీటిలో ఏవీ బాగా ప్రాచుర్యం పొందలేదు. HA కోసం రెండు మారిన వ్యూహాలు, డీనాటరింగ్ యాంగిల్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (DGGE) మరియు టెంపరేచర్ యాంగిల్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (TGGE), జెల్ భాగం లేదా ఉష్ణోగ్రతను మార్చడం ద్వారా జెల్‌లోని హెటెరోడుప్లెక్స్ DNA యొక్క పునరావాస వాయిదాను మెరుగుపరచడానికి సృష్టించబడ్డాయి. ఈ వ్యూహాలకు బహుశా HA కంటే ప్రాధాన్య స్థానం ఉన్నప్పటికీ, వాటిని అమలు చేయడానికి లేదా జెల్ చేయడానికి అసాధారణమైన గేర్ అవసరం. ఈ పద్ధతిలో, ఈ సర్దుబాటు పద్ధతులు మొదటి HA వలె ప్రసిద్ధి చెందలేదు. డినాచరింగ్ ఎలైట్ ఫ్లూయిడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (DHPLC) అనేది ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌ను కలిగి ఉండని ఒక విధమైన పోర్టబిలిటీ మూవ్ ఎగ్జామినే, అయితే HPLC విభాగంలో హెటెరోడుప్లెక్స్ యొక్క క్షీణించిన నిర్వహణ సీజన్‌పై ఆధారపడి మార్పులను వేరు చేస్తుంది. ఈ కొత్త ఆవిష్కరణ అధిక ప్రభావశీలతను సాధించినప్పటికీ, ప్రతి DNA సమూహానికి మార్పు గుర్తింపు పరిస్థితుల యొక్క దుర్భరమైన మెరుగుదల గొప్ప ప్రభావశీలతను పొందడం అవసరం, ఇది సాంప్రదాయ హార్డ్‌వేర్ మరియు రియాజెంట్‌ల వలె ఆదర్శ పరివర్తన స్క్రీనింగ్ టెక్నిక్ అవసరం; ఏదైనా DNA సమూహాలకు మరియు మార్పు రకాలకు ఏకాంత సమావేశం వర్తించవచ్చు; మరియు అధిక ప్రభావశీలత, అధిక నిర్గమాంశ మరియు ముఖ్యమైన వ్యయ అమలును సాధిస్తుంది. కాంపౌండ్ బంగిల్ క్లీవేజ్ (EMC) బహుశా ఈ ప్రమాణాలను సంతృప్తిపరుస్తుంది.