ISSN: 2329-6917
Yihui He, Xiaoyan చెన్ మరియు Lingying Kong
నేపథ్యం: బీటా-హైడ్రాక్సీసోవాలెరిల్షికోనిన్ (బీటా-HIVS) అనేది సాంప్రదాయ ఓరియంటల్ మెడిసినల్ హెర్బ్ లిథోస్పెర్మ్ రాడిక్స్ నుండి వేరుచేయబడిన సమ్మేళనం. ఈ ఔషధం ప్రోటీన్-టైరోసిన్ కినాసెస్ (PTKs) యొక్క ATP నాన్-కాంపిటేటివ్ ఇన్హిబిటర్గా పాత్రను పోషిస్తుంది మరియు మానవ క్యాన్సర్ కణాలకు వ్యతిరేకంగా అపోప్టోసిస్ను ప్రేరేపించడానికి గొప్ప సామర్థ్యాన్ని చూపుతుంది. మేము బహుళ మైలోమా U266 కణాలపై బీటా-HIVS ప్రభావాన్ని పరిశోధించాము మరియు దాని అపోప్టోసిస్ను ప్రేరేపించే కార్యాచరణలో ప్రాథమిక యంత్రాంగం యొక్క వివరాలను వివరించాము. లక్ష్యం: U266 కణాలపై బీటా-HIVS యొక్క అపోప్టోసిస్-ప్రేరేపిత కార్యాచరణను అలాగే అంతర్లీన విధానాలను గుర్తించడం ఈ పని యొక్క లక్ష్యం. పద్ధతులు: U266 సెల్ ఎబిబిలిటీ మరియు కాలనీ నిర్మాణంపై బీటా-HIVS ప్రభావాలను అంచనా వేయడంలో సెల్ కౌంటింగ్ కిట్-8 (CCK-8) పరీక్ష మరియు కాలనీ-ఫార్మింగ్ అస్సే నిర్వహించబడ్డాయి. DAPI ఫ్లోరోసెన్స్ స్టెయినింగ్ మరియు DNA ఫ్రాగ్మెంటేషన్ అస్సేస్ ఆధారంగా అపోప్టోసిస్ విశ్లేషణ జరిగింది. Bcl-2 మరియు Bax mRNA వ్యక్తీకరణల మార్పులను అంచనా వేయడానికి రియల్-టైమ్ PCR ఉపయోగించబడింది, అయితే Bcl-2, Bax, కాస్పేస్-3, కాస్పేస్-9, PARP మరియు సైటోక్రోమ్ c యొక్క వ్యక్తీకరణను ధృవీకరించడంలో పరోక్ష ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ అస్సే మరియు వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ ఉపయోగించబడ్డాయి. . ఫలితాలు: CCK-8 పరీక్ష మరియు కాలనీ-ఫార్మింగ్ అస్సే బీటా-HIVS చికిత్స ఫలితంగా కణాల విస్తరణ (P <0.05 లేదా 0.01) మరియు కాలనీ నిర్మాణం (P <0.01) గణనీయంగా తగ్గిందని చూపించింది. నిజ-సమయ PCR ఫలితాలు బీటా-HIVS సహ-సేద్యం (P <0.01) తరువాత Bcl-2 mRNA యొక్క వ్యక్తీకరణ స్థాయి 72h వద్ద తగ్గించబడిందని సూచించింది, అయినప్పటికీ Bax mRNA ఎటువంటి ప్రాముఖ్యత లేకుండా మార్చబడింది. ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ పరీక్షలో కాస్పేస్-3 బీటా-HIVS చికిత్స సమూహంలో సక్రియం చేయబడిందని, సైటోక్రోమ్ సి యొక్క పెరిగిన వ్యక్తీకరణతో పాటుగా ప్రదర్శించబడింది. బీటా-HIVS చికిత్స సమూహంలో Bcl-2 ప్రోటీన్ యొక్క వ్యక్తీకరణ తగ్గిందని మరియు సహ-సాగు తర్వాత 72h వద్ద సైటోక్రోమ్ c పెరిగిందని వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ కూడా ప్రదర్శించింది. అంతేకాకుండా, రెండు నియంత్రణ సమూహాలతో పోల్చినప్పుడు కాస్పేస్ -3 మరియు -9, అలాగే PARP అన్నీ P <0.01తో సక్రియం చేయబడ్డాయి. ముగింపు: బీటా-HIVS U266 కణాలలో అసాధారణమైన అపోప్టోసిస్-ప్రేరేపించే కార్యాచరణను వెల్లడించింది, బహుశా విస్తరణను నిరోధించడం ద్వారా మరియు మైటోకాన్డ్రియల్ పాత్వే ద్వారా అపోప్టోసిస్ను ప్రోత్సహించడం ద్వారా.