ISSN: 2168-9784
సతోరు కనెకో, యుకీ ఒకడా, కియోషి తకమత్సు
లక్ష్యం: ప్లాస్మా మరియు అవయవ పొరల సమగ్ర అంచనాలు మానవ స్పెర్మ్ సంతానోత్పత్తిని అర్థం చేసుకోవడం కొత్త విధానం. ప్రస్తుత అధ్యయనం మానవ స్పెర్మ్లోని ప్లాస్మా మరియు ఆర్గానెల్లె పొరలను అంచనా వేయడానికి స్పెర్మ్ నిర్ధిష్ట 2-దశల డై అబ్జామినేషన్ పరీక్షల యొక్క 2 రకాల అభివృద్ధి చేయబడింది.
పద్ధతులు: స్పెర్మ్ స్పెసిఫిక్ 2-స్టెప్ డై ఎక్స్క్లూజన్ అస్సే: స్పెర్మ్ ఐసోటానిక్ కల్చర్ మాధ్యమంలో రియాక్ట్ రెడ్ 195 (RR195) లేదా Cy3- కంజుగేటెడ్ కాంకనావలిన్ A (Cy3-con A)తో పొదిగేది, అవియాక్టివ్ బ్లూ 2422 లేదా అలెక్సాతో ప్రతిఘటించబడింది. మినహాయింపు తర్వాత వరుసగా మిథనాల్తో ప్లాస్మా పొర. మైటో ట్రాకర్ FM నిలుపుకోవడం ద్వారా మైటోకాండ్రియాలోని ఆర్గానెల్లె పొర యొక్క సమగ్రత గమనించబడింది. CellROX ఆరెంజ్ రియాక్టివ్ ఆక్సిజన్ జాతుల ద్వారా ఆక్సీకరణపై నారింజ ఫ్లోరోసెన్స్ను ఉత్పత్తి చేస్తుంది.
ఫలితాలు: స్పెర్మ్ స్పెసిఫిక్ 2-స్టెప్ డై ఎక్స్క్లూజన్ అస్సే అనేది పాడైన ప్లాస్మా మరియు ఆర్గ్నెల్ పొరల ద్వారా న్యూక్లియైలకు మొదటి రంగు యొక్క పారగమ్యత మరియు బైండ్తో కూడి ఉంటుంది, పొర మినహాయించిన తర్వాత, కొత్తగా బహిర్గతమైన న్యూక్లియైలు లేదా లోపలి అక్రోసోమల్ మెంబ్రేన్ రెండవ రంగుతో ప్రతిఘటించబడ్డాయి. మానవ మోటైల్ స్పెర్మ్ (లైవ్ స్పెర్మ్; LS)లోని ప్లాస్మా మరియు అక్రోసోమల్ పొరలలో చెక్కుచెదరకుండా RR195 మరియు Cy3-కాన్ అని మినహాయించబడింది, అయితే డీనాట్ చేయబడినవి పారగమ్యతను ఆమోదించింది. LS రంగు బులే లేదా ఉత్పత్తి చేయబడిన ఆకుపచ్చ ఫ్లోరోసెన్స్, ఒక వైపు, డీనాట్ చేయబడిన వారు వరుసగా ఎరుపు లేదా ఎరుపు ఫ్లోరోసెన్స్ను చేశారు. మైటోకాండ్రియాలోని మిటో ట్రాకర్ FM మరియు సెల్రాక్స్ ఆరెంజ్ యొక్క ఫ్లోరోసెన్స్ మైకాండ్రియాలోని ఆక్సీకరణ ఫాస్ఫోరైలేషన్ సాధారణతను చెక్కుచెదరని అవయవ పొరతో ధృవీకరించబడింది. డెరివేటివ్ సింగిల్-స్టెప్ RR195 మినహాయింపు పరీక్ష అనేది ICSIలో మోటైల్ స్పెర్మ్ యొక్క ఇంట్రా-ఆపరేటివ్ నాన్-డిస్ట్రాక్టివ్ అసెస్మెంట్ కోసం ఆచరణీయ అభ్యర్థి.
ముగింపు: డై ఎక్స్క్లూజన్ మరియు రిటెన్షన్ అస్సేస్ స్పెర్మ్ క్వాలిటీస్ యొక్క ప్రీ-ఆపరేటివ్ అసెస్మెంట్స్గా ప్రీదోహదపడతాయి మరియు ఇంట్రా సైటోప్లాస్మిక్ స్పెర్మ్ ఇంజెక్షన్లో ఇంట్రా-ఆపరేటివ్ స్పెర్మ్ ఎంపిక కోసం సవరించిన సింగిల్-స్టెప్ డై ఎక్స్క్లూజన్ అస్సే ఉపయోగపడుతుంది.