జర్నల్ ఆఫ్ సెల్ సైన్స్ & థెరపీ
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

ఎలుకలలో స్పెర్మాటోజెనిసిస్ సమయంలో సి-కిట్ ట్రాన్స్‌జీన్ నిర్మాణం యొక్క రూపకల్పన మరియు పరమాణు లక్షణం

స్వానంద్ కోలి, అరుణ్ పి సికార్వార్, మురళి ఆర్ బాబు మరియు రెడ్డి కెవిఆర్

ప్రసవానంతర వృషణంలో, భేదం లేని టైప్-ఎ స్పెర్మాటోగోనియల్ స్టెమ్ సెల్స్ (ఎస్‌ఎస్‌సి) సి-కిట్ సమక్షంలో టైప్-బి స్పెర్మాటోగోనియల్ సెల్స్ (ఎస్‌జిసిలు)గా విభేదిస్తాయి, ఇది క్షీరదాలలో స్పెర్మాటోజెనిసిస్ సమయంలో సెల్/దశ నిర్దిష్ట పద్ధతిలో వ్యక్తీకరించబడుతుంది. సి-కిట్ గట్టి ట్రాన్స్‌క్రిప్షనల్ నియంత్రణకు లోబడి ఉంటుంది, ఎందుకంటే ఇది సూక్ష్మక్రిమి కణాలకు మాత్రమే కాకుండా హెమటోపోయిటిక్ మూలకణాలు మరియు మెలనోసైట్‌ల అభివృద్ధికి కూడా అవసరం. అయినప్పటికీ, సి-కిట్ వ్యక్తీకరణ డైనమిక్‌గా నియంత్రించబడిన ప్రక్రియ, స్పెర్మాటోజెనిసిస్ సమయంలో దాని ట్రాన్స్‌క్రిప్షనల్ రెగ్యులేషన్‌కు పరమాణు ఆధారం ఎక్కువగా గుర్తించబడలేదు. Wv/Wv ఉత్పరివర్తన చెందిన ఎలుకల నుండి వేరుచేయబడిన సి-కిట్ నెగటివ్ SSC లలోకి ట్రాన్స్‌జీన్ నిర్మాణాన్ని ఎక్స్‌ప్రెస్ చేసే సి-కిట్ పరిచయం గ్రహీత ఎలుకల వృషణాలలో తేడాను కలిగిస్తుందో లేదో నిర్ణయించడం అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం. ఈ ప్రయోజనం కోసం, 4.4 kb c-Kit-ORFGFP ఎక్స్‌ప్రెషన్ క్యాసెట్‌ను కలిగి ఉన్న 7.4 kb pG1-Kit-ORF-GFP ట్రాన్స్‌జీన్ నిర్మాణం రూపొందించబడింది మరియు దాని ఇన్ విట్రో వ్యక్తీకరణ ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ మరియు ఫ్లోసైటోమెట్రీ విశ్లేషణ ద్వారా నిర్ధారించబడింది. ఫలితాల పోలిక కోసం, 1.1 kb (సి-కిట్ ప్రమోటర్ మరియు ORF రెండూ లేకపోవడం), 4.1kb (సి-కిట్ ప్రమోటర్ లేకపోవడం) మరియు 1.4 kb (సి-కిట్-ORF లేకపోవడం) కలిగిన మూడు నియంత్రణ-GFP నిర్మాణాలు కూడా రూపొందించబడ్డాయి మరియు ఎలక్ట్రోపోరేషన్ (EP) ద్వారా SSCలలో ప్రవేశపెట్టబడింది. ఈ SSCలు జెర్మ్ సెల్ ట్రాన్స్‌ప్లాంటేషన్ (GCT) విధానాన్ని ఉపయోగించి రెటే ద్వారా బుసల్ఫాన్ చికిత్స పొందిన గ్రహీత వంధ్య ఎలుకల వృషణంలోకి ప్రవేశపెట్టబడ్డాయి. C-Kit-ORF-GFP ట్రాన్స్‌జీన్ ఇన్‌సర్ట్‌ను మోసుకెళ్లే SSCలు నియంత్రణలతో పోలిస్తే స్వీకర్త ఎలుకల సెమినిఫెరస్ ట్యూబుల్స్‌లోని ఇతర సూక్ష్మక్రిమి కణ వంశాలలో వలసరాజ్యం మరియు విభిన్నతను కలిగి ఉన్నాయని గమనించబడింది. ముగింపులో, వృషణము Wv/Wv ఉత్పరివర్తన చెందిన ఎలుకలు SSCల జనాభాను కలిగి ఉన్నాయి, దీనిలో c-కిట్ సిగ్నలింగ్ పనితీరు బలహీనపడింది, గ్రహీత సంతానోత్పత్తి లేని ఎలుకలలో SSCల పనితీరును c-కిట్ పరిచయంతో పునఃప్రారంభించవచ్చని మేము నివేదించాము. -ORF-GFP ట్రాన్స్‌జీన్ ఇన్సర్ట్. అందువల్ల ప్రస్తుత పరిశోధనలు పునరుత్పత్తి శరీరధర్మ శాస్త్రం మరియు వృషణ వైఫల్యం ఉన్న రోగులలో నవల భవిష్యత్ చికిత్సల సంభావ్యతను అర్థం చేసుకోవడంలో గణనీయమైన ప్రభావాన్ని చూపుతాయి.