జర్నల్ ఆఫ్ క్లినికల్ అండ్ ఎక్స్పెరిమెంటల్ ఆప్తాల్మాలజీ
అందరికి ప్రవేశం

నైరూప్య

ట్రాబెక్యులర్ మెష్‌వర్క్ కణాలలో నియంత్రించదగిన యురోకినేస్ జన్యు వ్యక్తీకరణ

మెయి సుడా, షిహో కనెకో, అకిరా ఆండో, టెట్సుయా నిషిమురా, ఎమికో ఒకుడా-అషిటకా, సీజీ ఇటో, మకోటో టామోటో, మియో మత్సుమురా మరియు కంజి తకహషి

ప్రయోజనం: గ్లాకోమా అనేది ఒక రకమైన ప్రగతిశీల ఆప్టిక్ న్యూరోపతి, ఇది చివరకు ఎలివేటెడ్ ఇంట్రాకోక్యులర్ ప్రెజర్ (IOP)కి సంబంధించిన అంధత్వానికి దారితీస్తుంది. ట్రాబెక్యులర్ మెష్‌వర్క్ (TM) మరియు జక్స్టా-కెనాలిక్యులర్ కనెక్టివ్ టిష్యూలలో ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ మ్యాట్రిక్స్ చేరడం, ఇది సజల అవుట్‌ఫ్లో పాత్‌వేని ఏర్పరుస్తుంది, ఇది IOP పెరగడానికి ప్రధాన కారణం కావచ్చు, అందువలన ఫైబ్రినోలైటిక్ సిస్టమ్ IOP నియంత్రణతో సంబంధం కలిగి ఉండవచ్చు. మేము TM కణాలలోకి నియంత్రించదగిన యురోకినేస్ ప్లాస్మినోజెన్ యాక్టివేటర్ (uPA) జన్యు బదిలీ యొక్క అవకాశాన్ని పరిశీలించాము.
పద్ధతులు: ట్రాబెక్యూలెక్టమీ ప్రక్రియల సమయంలో పొందిన పోర్సిన్ కళ్ళు మరియు మానవ TM కణాల నుండి TM కణాలు తాజాగా వేరుచేయబడ్డాయి మరియు కల్చర్ చేయబడ్డాయి. మొత్తం RNA మానవ TM కణాల నుండి సంగ్రహించబడింది మరియు cDNA లోకి రివర్స్ ట్రాన్స్క్రిప్ట్ చేయబడింది. uPA యొక్క జన్యు వ్యక్తీకరణను గుర్తించడానికి రివర్స్-ట్రాన్స్‌క్రిప్టెడ్ పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (RT-PCR) పద్ధతిని ప్రదర్శించారు. మానవ uPA యొక్క cDNA ఎక్స్‌ప్రెషన్ వెక్టర్ (pEYFP-N1 వెక్టర్) మరియు నియంత్రించదగిన ఎక్స్‌ప్రెషన్ వెక్టర్ (TRE-టైట్ వెక్టర్)గా ఉప-క్లోన్ చేయబడింది, ఆపై ప్రతి వెక్టర్ స్వతంత్రంగా కల్చర్డ్ పోర్సిన్ TM కణాలలోకి బదిలీ చేయబడింది. pTet-ON మరియు TRE-టైట్ వెక్టర్‌లను సక్రియం చేయడానికి డాక్సీసైక్లిన్ సంస్కృతి మాధ్యమానికి జోడించబడింది. చివరగా, uPA యొక్క వ్యక్తీకరణ ఎంజైమ్ లింక్డ్ ఇమ్యునోసోర్బెంట్ అస్సే (ELISA) ఉపయోగించి పరిశీలించబడింది.
ఫలితాలు: pEYFP-N1 వెక్టర్‌ని ఉపయోగించి మానవ uPA జన్యువుతో బదిలీ చేయబడిన కల్చర్డ్ పోర్సిన్ TM కణాల నుండి మాధ్యమంలో uPA (3.5 ng/ml) యొక్క వ్యక్తీకరణను ELISA పరిశోధనలు వెల్లడించాయి. డాక్సీసైక్లిన్ pTet-On మరియు TRE-టైట్ వెక్టర్స్‌లో మానవ uPAని ప్రేరేపించింది, మానవ uPA జన్యు సహ-బదిలీ TM కణాలతో మోతాదు-ఆధారిత పద్ధతిలో.
తీర్మానాలు: యుపిఎ యొక్క నియంత్రించదగిన జన్యు బదిలీ, ఇది జక్స్టా-కెనాలిక్యులర్ కనెక్టివ్ టిష్యూలోని ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ మాతృకను TM కణాలలోకి దిగజార్చవచ్చు, ఇది టెట్-ఆన్ సిస్టమ్‌ను ఉపయోగించి సాధించబడింది. ప్రస్తుత పద్ధతి గ్లాకోమాకు నవల చికిత్సగా ఉపయోగపడుతుంది.